生物樣本前處理解決方案

臨床手術取下的生物樣本灌注福爾馬林后，經過醫護人員的運送，運至病理科，再由病理科人員進行登記錄入，隨后進行取材，后將剩余生物樣本進行至少1月的留存。

在轉移過程中可能會出現以下幾點風險： 

樣本信息丟失：固定時間不可控，如固定不充分，深部區域持續發生降解

醫護人員受到污染：灌注福爾馬林及轉運過程中福爾馬林的揮發與外溢

樣本轉移運輸困難：福爾馬林桶很沉難以運輸

新鮮樣本轉送難題：要求快速處理，且有污染風險

歐盟第895/2014號規定(2014年8月14日發布) (EC) 第1907/2006號修正XIV：歐洲議會和理事會關于化學品登記、評估、授權和限制的條例：甲醛，與苯胺的低聚物反應產物(技術MDA)符合致癌分類標準(1B類) 。

目前上已經對有毒性的固定液福爾馬林使用進行限制，為了確保整個生物樣本處理過程中操作者的安全，很有必要在密封的環節下使用固定液。且生物樣本的安全性對醫生、患者及科室都是重中之重，需要對樣本的追溯，從樣本轉移的整個流程進行監控，從而確保生物樣本的質控標準化。

樣本真空系統，使得保存真空密封的“新鮮”樣本第*次成為可能，即是使用福爾馬林也可其與醫護患者的直接接觸，消除外科手術室中一級致癌物福爾馬林對醫護人員的健康危害，并能夠持續監測樣本從外科手術室到病理科的溫度和時間，全流程可追溯，提升樣本的質控標準化，在4°C溫度下可保存72h不改變樣本生物學特性，并已經在歐美臨床廣泛使用。
    對于不同類型、大小的組織樣本，采用抽真空（真空度可調）的方式密封樣本，使組織減少和空氣的接觸，密封在不同的專用樣本袋中，保持樣本的原始性、真實性。真空密封后，降低組織的自溶率，組織形態結構保存更加完好。新鮮樣本的原始信息得到保留的同時，有利于控制固定時間，有利于免疫組化、分子生物學研究、組織標本庫的建立，保證樣本的信息完整性。

下面為生物樣本在運送與保存時的改善：
 

規范性

通過質量比控制使用福爾馬林的量，可也選擇不使用福爾馬林

規范轉移流程，記錄數據，使得所有樣本可追溯

利于控制固定時間，利于IHC和分子研究

安全性

規范福爾馬林的應用，降低與一級致癌物的接觸，保障醫護人員安全

真空密封后,沒有福爾馬林揮發與外溢，保障樣本安全

降低與空氣接觸，降低自溶率，保持樣本原始信息

取材后留存剩余樣本，保障樣本存儲及醫院環保安全

經濟性

樣本袋密封后減少了空間，降低了醫療廢棄物處理成本

減少福爾馬林使用,降低廢液處理成本

便捷性

儲存在密封樣本袋中,更加節約空間

也可以不放福爾馬林直接密封儲存

近年來，歐洲和美國的醫院開始陸續采用這一創新平臺，發表的專著眾多，摘錄如下幾篇具有代表性的文章和大家分析。各個方面的研究表明：在組織學、生物標記物和核酸方面，真空低溫保存樣本都能夠有效保存樣本的生物學信息，對于組織庫、外科臨床、病理科和患者都能帶來莫大的益處。

1. 真空4℃保存72-168個小時的前列腺組織中的RIN與開始時間相比較，高達93-87%的信息都被有效保存。

2. 周五下午進行手術獲得的樣本真空4℃保存至周一操作，其和周一至周四手術樣本得到同樣的對待，有效保證了患者的權益。

3. 外科手術室中護士血液中的15-F2t-異脯氨酸和丙二醛的水平較高, 生物標記物分析證實空氣中甲醛對氧化應激的發生有直接作用，使用真空密封技術能夠顯著減少暴露危險。

4. 組織質量指數(TQI)：一種內在的控制，它可以在定量測量少數選定的信息表位的基礎上，對蛋白質狀況進行全面評估。 對pHSP 27、細胞角蛋白和pERK 1/2的定量和TQI的計算表明，通過低溫真空密封和儲存，可以更好地保存組織。 

5. 真空低溫可保存組織標本進行組織學、轉錄和蛋白質組學檢查，長可達48小時甚至更長。

6. 低氧張力是干細胞微環境的重要組成部分，真空條件下組織樣本的缺氧狀態可能使未分化的干細胞/祖細胞存活。

7.  腫瘤的原代組織培養中細胞活力在24個小時后還可達89.3%。

 參考文獻：

1. Vacuum Sealing for a Safe Transfer of Tissue from Operation Theatre to Laboratory Using TissueSAFE Milestone Apparatus. Isidro-Marron P¹; Vallina-Alvarez A²; Montoya-Sanchez A²; Astudillo-Gonzalez, A². 

采用Milestone的TissueSAFE設備進行真空密封把組織從外科手術室轉移到實驗室。

2. Tissue transfer to pathology labs: under vacuum is the safe alternative to formalin. Gianni Bussolati, Luigi Chiusa, Antonio Cimino, Giuseppe D’Armento. Virchows Arch. 2008 Feb;452(2):229-31. 

組織轉移到病理實驗室：在真空下的一種替代福爾馬林的安全選擇。

3. Vacuum-based preservation of surgical specimens: An environmentally-safe step towards a formalin-free hospital. Cinzia Di Novi, Davide Minniti, Silvana Barbaro, Maria Gabriella Zampirolo, Antonio Cimino, Gianni Bussolati. Science of the Total Environment 408 (2010) 3092-3095.

基于真空的保存外科標本的方法：環保安全，邁向無甲醛實驗室。

4. Towards a formalin-free hospital. Levels of 15-F2t-isoprostane and malondialdehyde to monitor exposure to formaldehyde in nurses from operation theatres. Valeria Bellisario, Giulio Mengozzi, Elena Grignani, Massimiliano Bugiani, Anna Sapino, Gianni Bussolati and Roberto Bono. Royal Society of Chemistry Toxicology Research. 

面向無福爾馬林的醫院-手術室護士暴露在甲醛中的15-F2t-異脯氨酸和丙二醛的水平。  

5. Histologic validation of vacuum sealed, formalin-free tissue preservation, and trasport system. Richard J. Zarbo Pathology and Laboratory Medicine, Henry Ford Health System, 2799 West Grand Blvd, Detroit, MI 48202, USA. 

真空密封、無福爾馬林組織保存和運輸系統的組織學驗證。

6. Pre-Analytics of Pathological Specimens in Oncology, Recent Results in Cancer Research. 199, DOI 10.1007/978-3-319-13957-9_2. Mr. Dietel et al.

近期癌癥診斷中病理樣本的前處理。

7. A tissue quality index: an intrinsic control for measurement of effects of preanalytical variables on FFPE tissue. Veronique M Neumeister, Fabio Parisi, Allison M England, Summar Siddiqui, Valsamo Anagnostou, Elizabeth Zarrella, Maria Vassilakopolou, Yalai Bai, Sasha Saylor, Anna Sapino, Yuval Kluger, David G Hicks, Gianni Bussolati, Stephanie Kwei and David L Rimm. Laboratory Investigation (2014) 94, 467-474. 

組織質量指數：測定前處理變量對FFPE組織影響的內在控制。

8. Applicability of Under Vacuum Fresh Tissue Sealing and Cooling to Omics Analysis of Tumor Tissues. Veneroni Silvia, Dugo Matteo, Daidone Maria Grazia, Iorio Egidio, Valeri Barbara, Pinciroli Patrizia, De Bortoli Maida, Marchesi Edoardo, Miodini Parizia, Traverna Elena, Ricci Alessandro, Canevari Silvana, Pelosi Giuseppi, and Bongarzone Italia. Biopreservation and Biobanking. December 2016, 14(6): 480-490.

真空下組織封閉冷卻技術在腫瘤組織組學分析中的應用。

9. Efficient stem cell isolation from under vacuum preserved tissue samples. Aldo Moggio, Giuseppe D Armento and Benedetta Bussolati. Organogenesis 83, 1-5, July/August/September 2012.

真空保存組織標本中干細胞的有效分離。

10. A Collection of Primary Tissue Cultures of Tumors from Vacuum Packed and Cooled Surgical Specimens: A Feasibility Study. Laura Annaratone, Caterina Marchio, Rosalia Russo, Luigi Ciardo, Sandra Milena Rondon-lagos, Margherita Goia, Maria Stella Scalzo, Stefania Bolla, Isabella Cassellano, Ludovica Verdum di Cantogno, Gianni Bussolati, Anna Sapino. PLOS September 2013,Volume 8, Issue 9, e75193. 

從真空包裝和冷卻的外科標本中收集腫瘤的原代組織培養物：一項可行性研究。

樣本真空系統，可以有效的消除醫護人員與一級致癌物的接觸，并能*大化保護生物樣本安全，所謂危難時刻見真情，中國的醫護人員都是逆風而上的英雄，為了守護人民的安全不斷在危難時刻挺身而出，不僅是因為“健康所系，性命相托”的誓言與責任，更是為了“大家”與“小家”扛起了責任，在被他們守護的時候，他們同時也需要被我們守護，關注醫生健康，關注每一個風險環節，愿所有醫生能得到信任與愛護！

中國醫生平凡而偉大，中國加油，武漢加油！